2018齐墩果酸固体脂质纳米粒的制备与质量评价

1290675

　　【关键词】 齐墩果酸；固体脂质纳米粒；质量评价
　　Preparation and quality evaluation of oleanolic acidloaded solid lipid nanoparticles
　　【Abstract】 AIM: To prepare the oleanolic acidloaded solid lipid nanoparticles (OASLN), determine the content of oleanolic acid in OASLN, and evaluate its quality. METHODS: OASLN were prepared by filmultrasound dispersion technique. The encapsulation efficiency and appearance of solid lipid nanoparticles were studied. RESULTS： The appearance of prepared solid lipid nanoparticles was regular with the diameter being （62.0±10.3） nm, the encapsulation efficiency was 98.29% and the loading rate was 8.17%. CONCLUSION： The selected preparation technique of OASLN is rational and practicable. It provides experimental evidence for developing a new oleanolic acid injection.
　　【Keywords】 oleanolic acid； solid lipid nanoparticles； quality evaluation
　　【摘要】 目的：对齐墩果酸固体脂质纳米粒的制备工艺和含量测定方法进行研究，并对其质量进行评价. 方法：采用薄膜超声分散法制备齐墩果酸固体脂质纳米粒，并对其包封率、形态等性质进行研究. 结果：制得齐墩果酸固体脂质纳米粒形态均匀圆整、粒径范围为(62.0±10.3) nm，包封率为98.29%，载药量为8.17%. 结论: 选择薄膜超声分散法制备齐墩果酸固体脂质纳米粒方法可行,为开发齐墩果酸新型注射制剂提供了实验依据.
　　【关键词】 齐墩果酸；固体脂质纳米粒；质量评价
　　0引言
　　齐墩果酸（oleanolic acid, OA）是一种五环三萜类化合物，国内临床上主要用于慢性肝炎的治疗以及多方面保肝作用［1］. 固体脂质纳米粒(solid lipid noparticles，SLN)系指以固态的天然或合成类脂如大豆磷脂、三酰甘油等为载体材料，将药物包裹或内嵌于类脂核中，制成粒径约为10～1000 nm的固体胶粒给药系统［2］. 本实验我们以大豆磷脂为载体，采用薄膜超声分散法制备齐墩果酸固体脂质纳米粒, 期望提高齐墩果酸的肝脏靶向性.
　　1材料和方法
　　1.1材料LC10AVP高效液相色谱仪（日本岛津公司），SephadexG50凝胶（Sigma公司），RE52旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂），KQ250型超声波发生器（江苏昆山淀山湖检测仪器厂），BP190S电子天平（德国赛多利斯），齐墩果酸（陕西慧科公司,批号050322），大豆磷脂（上海太伟药业有限公司，批号040716）,其他试剂均为国产分析纯.
　　1.2方法
　　1.2.1齐墩果酸固体脂质纳米粒的制备精密称取处方量物质于100 mL圆底烧瓶中，加入15 mL氯仿溶解. 39℃旋转蒸发10 min除去氯仿，在烧瓶壁上形成一层薄膜. 加入60 mL/L甘露醇水溶液15 mL，40℃水浴超声30 min,0.45 μm微孔滤膜过滤，分装于安瓿中［3］.
　　1.2.2外观及其粒径取新制备的OA固体脂质纳米粒适量, 60 mL/L的甘露醇溶液超声分散,少许滴至专用铜网，用20 mL/L磷钨酸染色，自然干燥，使粒子在铜网上浓缩沉积，用电子显微镜观察并拍照.
　　1.2.3包封率及载药量的测定
　　1.2.3.1色谱条件色谱柱KromasilC18；流动相为甲醇∶水（90∶10）；流速1.0 mL/min；温度：室温；检测波长：210 nm；进样体积：20 μL. 在此色谱条件下，得OA固体脂质纳米粒色谱图，结果显示，共存组分不干扰主药测定（图1）.
　　1.2.3.2线性关系精密称取105℃干燥恒质量的OA对照品11.07 mg， 用甲醇溶解后， 移至10 mL容量瓶中， 甲醇定容至刻度， 摇匀， 精密量取此溶液（1.086 g/L） 3.0,2.0，1.0，0.5，0.3，0.1 mL分别置于6个25 mL的容量瓶中，然后在每个容量瓶中加入1 mL空白SLN，并用甲醇定容至刻度，摇匀，得浓度范围为4.34～130.32 mg/L的系列标准溶液. 分别取此系列标准溶液20 μL进样，计算峰面积的平均值.
　　图1OA固体脂质纳米粒高效液相色谱图　略
　　1.2.3.3回收率及精密度试验按照OASLN溶液中原辅料间的比例,精密称定,用甲醇稀释配制高、中、低三种不同浓度的供试品65.16，32.58，10.86 mg/L，取已知浓度的OA对照品溶液，用外标法依次测定含量，每次进样20 μL. 同时考察于室温25℃避光放置1 d和5 d的日内和日间变异性.
　　1.2.3.4载药量和包封率的测定采用凝胶柱层析法. 凝胶柱为SephedexG50,洗脱液为蒸馏水,流速为0.5 mL/min,层析温度为室温. 分别移取OA固体脂质纳米粒0.5 mL上柱，每3.0 mL收集一次，共收集25±3管. 以柱层析条件洗脱，应用HPLC测定SLN中药物含量以及游离药物量. 包封率=（W总-W游）/W总×100%. W总表示总药物含量，W游表示游离药物量. 载药量=（Wt-Wi）/WC×100%，其中Wt为SLN溶液中药物量，Wi为溶液中游离药物量，WC为大豆磷脂量［5］.